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【摘要】 目的 探讨免疫胶体金与化学匹拉米洞两种方法的优缺点、适用范围及临床应用价值。方法 100例随机门诊及住院患者的粪便样本和50例上消化道出血患者的柏油便样本， 分别在相同条件下应用免疫胶体金法和化学匹拉米洞法， 比较两种检测方法的阳性率。结果 100例随机粪便样本隐血试验匹拉米洞法阳性率为52%， 免疫胶体金法阳性率为15%， 比较差异有统计学意义（P<0.05）。50例上消化道出血隐血化学匹拉米洞法阳性率为100%， 免疫胶体金法阳性率为86%， 比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论 免疫胶体金法假阳性率低， 化学匹拉米洞法假阳性率高， 特异性差， 两种方法结合可提高检测的准确性。化学匹拉米洞法干扰因素多假阳性结果较多， 但对假阳性结果可以用免疫胶体金法予以纠正。
【关键词】 上消化道出血；隐血；免疫胶体金法；化学匹拉米洞法
DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.27.107
粪便隐血试验现常用的主要有化学匹拉米洞法和免疫胶体金法两种。化学匹拉米洞法灵敏度较好， 属于中度灵敏试验， 能检测到1 mg/L的血红蛋白（Hb）， 消化道出血5～10 ml即可为阳性， 但特异性低， 易受到外源性食物如含有血红素、血红蛋白、肌红蛋白以及铁剂、肉类、绿叶蔬菜等影响出现假阳性[1]。由于化学试剂的不稳定性， 长期放置会出现反应减弱， 并且如果患者服用大量维生素C或其他具有还原作用的药物时会出现假阴性结果。免疫胶体金法灵敏度高于化学匹拉米洞法可以检测到最低0.2 μg/L的Hb， 最高检出浓度可达2000 μg/ml且不受相关食物药物影响[2]， 这说明免疫胶体金法对人体早期的消化道微量出血更敏感。但高于2000 μg/ml时， 由于前滞反应可出现假阳性。所以柏油样便出现假阳性时应充分稀释后进行检测。由于免疫胶体金法的高度敏感性， 某些服用刺激胃肠道药物后的正常人也可出现阳性结果。本文主要对两种方法在粪便隐血试验中及应用进行评价。报告如下。
1 材料与方法
1. 1 材料 全部粪便标本均系本院门诊及住院患者的随机标本。100例随机粪便样本和50例确诊为上消化道出血患者的柏油样便标本。年龄0～90岁， 男82例， 女68例。
1. 2 试剂 免疫胶体金法隐血试纸由上海凯创生物技术有限公司提供， 化学匹拉米洞检测由珠海贝索生物技术有限公司提供。
1. 3 方法 按照操作说明分别对100例随机标本及50例上消化道出血标本同时使用化学匹拉米洞法、免疫胶体金法进行隐血检测。
2 结果
2. 1 100例随机粪便样本应用化学匹拉米洞法检测的阳性率为52%， 胶体金法阳性率为15%， 比较差异具有统计学意义（P<0.05）。见表1。
2. 2 50例上消化道出血患者柏油便标本使用化学匹拉米洞法检测的阳性率为100%， 免疫胶体金法阳性率为86%， 比较差异具有统计学意义（P<0.05）。见表2。
3 讨论
大便隐血实验阳性率消化道溃疡为40%～70%， 消化道肿瘤为95%， 粪便中微量Hb的检出对消化道出血及消化道肿瘤的早期诊断有着重要意义。尤其是对于消化道肿瘤患者， 在早期无症状时粪便潜血即可为阳性， 所以此项检测也可以作为肠癌的重要参考指标， 可以早发现， 早治疗， 提高该病患者的生存率[3]。粪便隐血胶体金法的原理是免疫学上的双抗体夹心法， 故用单克隆抗体法检测粪便中的隐血时只有粪便中含有人的Hb， 隐血试验才为阳性， 而其他均为阴性。本文表1结果显示15例免疫胶体金法阳性结果均作了胃镜、直肠镜、内腔镜等检查。化学匹拉米洞法受饮食以及含亚铁离子的食物和药物对结果均有影响， 包括由于牙龈出血而咽下的血性唾液， 所有这些均可对化学反应造成干扰出现假阳性。如表1中化学匹拉米洞法阳性的52例患者有15例确诊为上消化道出血， 21例为柏油便或脓血便， 而其他均无明显消化道出血症状。通过表2发现了免疫胶体金法的一些缺陷。实验方法的不同有着不同的影响因素， 对于上消化道出血柏油类粪便的患者， 胶体金法有着较低的阳性率， 检测上消化道潜血40%～50%不能检出， 胶体金法检测为假阴性。所以在检测上消化道出血时免疫胶体金法阳性率低于化学匹拉米洞法。免疫胶体金法其最低检测浓度0.2 μg/ml其范围在0.2～2000 μg/ml， >2000 μg/ml时即出现后滞现象[4]。而Hb稳定性差， 在消化道中长期停留发生变性， 抗原性降低。在表2中7例柏油便且临床证实为消化道出血的患者免疫胶体金法检测阴性。所以对此种标本应稀释50～100倍重新测定；并且在冬天温度较低时会受到温度影响使有些阳性标本出现阳性结果较慢。
隐血试验对消化道出血疾病具有非常重要的诊断与鉴别诊断的价值， 要求其必须具有较高的灵敏度及特异性。不同的实验方法存在着不同影响因素， 检测结果也存在差异。通过本次试验比较作者认为， 粪便隐血试验免疫胶体金法特异敏感， 但存在假阴性可对临床造成误诊漏诊。化学匹拉米洞法干扰因素多假阳性结果较多， 但对假阳性结果可以用免疫胶体金法予以纠正。因此在实验室发出检验报告时应标注检验方法， 方便临床医生参考， 为临床提供准确无误的结果。
参考文献
[1]熊立凡.临床检验基础.北京：人民卫生出版社， 2004：243-244.
[2]苏丽莎， 路白杨. 试纸卡法和胶体金法检测大便潜血的方法学评价. 国际检验医学杂志， 2015（18）：2771-2772.
[3]王薇洁. 两种大便潜血检测试纸的性能比较. 山西医药杂志， 2014（18）：2212-2213.
[4]吴鹏， 李艳， 陈进， 等. 联合免疫法和化学法检测粪便隐血的临床应用评价. 检验医学， 2010， 25（3）：176-178.
[收稿日期：2016-08-16]